蛋白A/G瓊脂糖凝膠FF中壓預(yù)裝柱
| 【編號(hào)】BK-NRPB13S | 【CAS號(hào)】CAS | ||
| 【貨號(hào)】BK-NRPB13S-Y25 | 【規(guī)格】 | ||
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| 價(jià)格： 登錄查看 | |||
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品 名：蛋白A/G瓊脂糖凝膠FF
英文名：Protein A/G NUPharose Fast Flow, Protein AG NUPharose FF
規(guī) 格：20 ml，100 ml，1L，1 ml預(yù)裝柱，5 ml預(yù)裝柱，特殊規(guī)格定制
運(yùn) 輸：2 ~ 25℃，常壓、避光
貯 存：20%乙醇，2 ~ 8℃
保質(zhì)期：3年
相關(guān)介紹：
蛋白A蛋白G瓊脂糖凝膠FF是將重組蛋白A蛋白G融合蛋白（r-PAG，NRPA14S）鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的親和分離介質(zhì)。與單獨(dú)的蛋白A或蛋白G分離介質(zhì)相比，具有更寬廣的結(jié)合范圍，可以與人的所有IgG亞型、IgA、IgE、IgM結(jié)合，但不能與小鼠的IgA、IgM和血清白蛋白結(jié)合，適合用于鼠IgG單抗的提取和檢測(cè)。同時(shí)融合后的r-PAG降低對(duì)pH的依賴，允許在pH5 ~ 8進(jìn)行結(jié)合。
技術(shù)指標(biāo)：
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基質(zhì) |
4%交聯(lián)瓊脂糖凝膠微球 |
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配基 |
蛋白A蛋白G融合蛋白 |
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配基密度 |
≥6 mg/ml |
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填料粒徑 |
60 ~ 180 μm |
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最大流速 |
800 cm/h |
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推薦流速 |
20 ~ 100 cm/h |
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pH穩(wěn)定性 |
pH 3 ~ 9，pH2 ~ 10（清洗） |
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耐反壓 |
0.3 MPa |
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載量 |
≥ 20 mg/ml IgG |
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保存條件 |
2 ~ 8℃保存于20%乙醇溶液中 |
應(yīng)用舉例：
結(jié)合緩沖液：20 mM磷酸緩沖液，150 mM NaCl，pH 7.4
洗脫緩沖液：0.1 M Glycine-HCl緩沖液，pH 2.5
中和緩沖液：1 M Tris-HCl，pH 9.0
1)1 ml蛋白A蛋白G瓊脂糖凝膠FF預(yù)填柱用5 ~ 10個(gè)柱床體積的蒸餾水洗去保存液；
2)用結(jié)合緩沖液結(jié)合緩沖液平衡 5 ~ 10個(gè)柱床體積；
3)將3 ml兔多抗血清用結(jié)合緩沖液稀釋到15 ml，0.45 μm濾膜過(guò)濾上樣；
4)用結(jié)合緩沖液再洗 5 ~ 10個(gè)柱床體積；
5)用洗脫緩沖液洗脫抗體，收集洗脫峰，并用中和緩沖液調(diào)節(jié)其pH至中性；
6)目的抗體洗脫后用結(jié)合緩沖液清洗5 ~ 10個(gè)柱體積平衡柱子；
7)分析洗脫下來(lái)的兔多抗。
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種類 Species |
亞型 Antibody Class |
蛋白A Protein A |
蛋白G Protein G |
蛋白A蛋白G融合蛋白 Protein AG |
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人 Human |
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IgD IgA Fab |
+++ +++ + +++ + - + + |
+++ +++ +++ +++ - - - + |
+++ +++ +++ +++ + - + + |
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小鼠 Mouse |
IgG1 IgG2a IgG2b IgG3 IgM |
+ +++ +++ +++ - |
++ +++ +++ +++ - |
++ +++ +++ +++ - |
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大鼠 Rat |
IgG1 IgG2a IgG2b IgG2c |
+ - - +++ |
++ +++ + +++ |
++ +++ + +++ |
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牛 Cow |
IgG1 IgG2 |
+ +++ |
+++ +++ |
+++ +++ |
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山羊 Goat |
IgG1 IgG2 |
+ +++ |
+++ +++ |
+++ +++ |
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馬 Horse |
IgG(ab) IgG(c) IgG(T) |
+ + - |
- - +++ |
+ + +++ |
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兔Rabbit |
IgG |
+++ |
+++ |
+++ |
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豬Pig |
IgG |
+++ |
+ |
+++ |
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狗Dog |
IgG |
+++ |
+ |
+++ |
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雞Chicken |
IgY |
- |
- |
- |
注：-表示不結(jié)合；+表示微弱結(jié)合；++表示中等結(jié)合；+++表示很強(qiáng)結(jié)合。
注意事項(xiàng)：
1)預(yù)填柱使用簡(jiǎn)易方便，在沒(méi)有儀器設(shè)備的條件下也可以完成純化任務(wù)；
2)樣品洗脫后一般pH很低，應(yīng)立刻用堿性中和緩沖液（如1 M Tris-HCl，pH 9.0）將收集到的抗體溶液中和到中性，或在收集容器中事先裝5% ~ 10%、pH 7.5的緩沖液（如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸緩沖液），以利于維持抗體的生物活性，避免抗體失活；
3)使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡，如果已經(jīng)產(chǎn)生氣泡，可以自行重裝柱子；
4)多次使用后會(huì)有沉淀蛋白，強(qiáng)疏水性蛋白，脂蛋白，脂質(zhì)體等非特異吸附凝膠上，可以用0.1 %去垢劑短時(shí)間清洗，如0.1% Triton X-100清洗2個(gè)柱體積，立即用結(jié)合緩沖液洗5 ~ 10個(gè)柱體積。也可以用70%乙醇清洗作同樣清洗。
5)
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推薦流速 |
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預(yù)裝柱體積（ml） |
1 ml |
5 ml |
10 ml |
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流速(ml /min ) |
0.2 |
1 |
2 |
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