產(chǎn)品組分
組分
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性狀
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存儲(chǔ)條件
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規(guī)格
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A: CMCSMA
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白色海綿狀
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-20℃,避光
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0.2 g/瓶
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B:光引發(fā)劑 LAP
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白色粉末狀
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室溫,避光
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0.025 g/瓶
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儲(chǔ)存及運(yùn)輸
干態(tài); -20C避光.6個(gè)月.可常溫運(yùn)輸。溶液:4℃避光.7天;-20C避光、3個(gè)月;溶液反復(fù)凍融會(huì)影響產(chǎn)品性能,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
有效日期
生產(chǎn)日期見包裝。
溶液配制
1配制0.25%(w/v)引發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)溶液
(1)取10ml PBS,加入裝有引發(fā)劑LAР的棕色瓶中{內(nèi)含0.025g LAP);(2)以40-50°℃水浴加熱溶解15分鐘,期間振蕩數(shù)次。
該LAP標(biāo)準(zhǔn)液在4°℃避光條件下可保存12個(gè)月。2配制CMCSMA溶液〈建議CMCSMA濃度為1-3%(wv))
(1)取所需質(zhì)量的CMCSMA放入離心管;
(2取所需體積引發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到上述離心管中;
(3)于25-50℃溶解1-2h,期間不斷攪拌/振蕩;(CMCSMA 黏度大,溶解時(shí)間較長(zhǎng)}(4)將CMCSMA溶液使用0.22urm無(wú)菌針頭過濾器滅菌。
二維細(xì)胞培養(yǎng)建議
>將CMCSMA溶液注入孔板;
(96孔板:50-100uL/孔,46孔板:100-300L/孔,24孔板: 300~500uL/孑L)以405nm光源,輻照10-30秒使凝膠化. 可通過光照時(shí)間及強(qiáng)度調(diào)控凝膠強(qiáng)度;將培養(yǎng)基加入孔中覆蓋凝膠,置于37℃培養(yǎng)箱中5分鐘清洗祥品,吸去培養(yǎng)基;>將細(xì)胞懸浮液加入到孔板中即可。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行培養(yǎng)基更換、觀察拍照等操作
(操作程序無(wú)特殊要求)。
三維細(xì)胞培養(yǎng)建議
>收集細(xì)胞并用CMCSMA溶液重懸,配制細(xì)胞懸液;向孔板中加入細(xì)胞懸液;
(96孔板:50~100L/孔,48孔板:100~30QL/孔,24孔板: 300~500uL/孔L)以405nm光源.照射10-30秒使凝膠化. 可通過光照時(shí)間及強(qiáng)度調(diào)控凝膠強(qiáng)度;提示:加入一孔固化一孔,防止細(xì)胞沉淀。
>向各孔加入培養(yǎng)基,于37℃培養(yǎng)箱中5分鐘,清洗樣品,移去培養(yǎng)基;
加入新鮮培養(yǎng)基并長(zhǎng)期培養(yǎng)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行培養(yǎng)基更換、觀察拍照、免疫熒光染色等操作〈操作程序無(wú)特殊要求)。
溫馨提示:請(qǐng)勿直視固化光源。
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